Bioquímica

1. OBJETIVO Determinar de forma cuantitativa proteínas totales. 2. FUNDAMENTO Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo. Actúan como elementos estructurales y de transporte. Se dividen en dos fracciones, albúmina y globulinas. Su determinación es útil en la detección de:        - Hiperproteinemia producida por hemoconcentración, deshidratación o aumento en la concentración de proteínas especificas.        -Hipoproteinemia por hemodilución debida a un defecto en la síntesis         proteica, perdidas excesivas (hemorragias) o catabolismo proteico excesivo.  El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio. En medio alcalino, las proteínas dan un intenso color violeta azulado en presencia de sales de cobre; contiene yoduro como antioxidante. La intensidad del color formado es proporcional a la concentraci...

1. OBJETIVO Realizar una separación e identificación de los aminoácidos (L-arginina, Ác. glutámico y L-fenilalanina) mediante una cromatografía de capa fina ascendente. 2. FUNDAMENTO La cromatografía de capa fina consta de un soporte que es plano y consiste en una capa muy fina de partículas (gel de sílice, celulosa, poliaminas, gel de silicato magnésico, etc.) situadas sobre una lámina de vidrio, plástico o aluminio.  La fase móvil es un líquido adecuado a las sustancias a separar, mientras que la fase estacionaria está representada por las partículas depositadas sobre el soporte (cromatografía L/S).  La muestra se coloca sobre el soporte, se deja secar y, tras la introducción del conjunto en la cámara cromatográfica, será arrastrada por la fase móvil de una manera similar a la de la cromatografía sobre papel.  El movimiento de la fase móvil puede ser ascendente o descendente, igual que en el caso anterior. El mecanismo de separación es del tipo de la adsorci...

1. OBJETIVO Manejar el refractómetro clínico. 2. FUNDAMENTO La refractometría es ''una técnica usada analítica que determina la densidad de una disolución en base a la modificación que dicha densidad induce en su índice de refracción''.   Para llevarla a cabo se necesita un r efractómetro , que mide el ángulo de refracción de la luz al atravesar un líquido a una temperatura determinada. Este instrumento óptico consta de dos prismas entre los cuales se coloca la muestra, y sobre los que hacemos incidir la radiación. Este haz de luz, al atravesar la muestra, se refracta y se recoge como un único rayo de luz blanca, cuyo ángulo puede ser medido por un sistema óptico.  La calibración de estos aparatos puede hacerse con agua destilada, o con solución salina de densidad conocida. 3.MATERIALES Refractómetro Muestra a medir Agua destilada Pipeta Pasteur 4.PROCEDIMIENTO Abrir la placa que cubre el prisma y limpiar ambos con alcoho...

1. OBJETIVO Medir la concentración de una muestra de orina y su turbidez. 2. FUNDAMENTO La  turbidimetría  es una técnica analítica de medición que determina cuánto se atenúa un haz de luz que se traslada a través de una suspensión. Esta atenuación se produce gracias a los fenómenos de absorción y dispersión que experimenta la luz debido a las partículas. Entonces, se pueden deducir las dimensiones de las partículas presentes en una suspensión mediante la medición de la turbidez que hay en esta. En este sentido, este procedimiento se usa para cuantificar la absorción y dispersión de la luz: se demuestra su dependencia de las dimensiones de las partículas y de la concentración de estas en la suspensión. 3.MATERIALES 9 tubos de ensayo de 10 ml  4 tubos de ensayo de 13 ml Muestra de orina en tubo cónico de 13 ml 7 cubetas de espectrofotometría Portacubetas Puntas de micropipeta de distintos tamaños Suero salino 0'9% Micropipetas de di...

1. OBJETIVO Determinar cuantitativamente la glucosa presente en una muestra problema. 2. FUNDAMENTO La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico. El peróxido de hidrógeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor cromogénico de oxigeno, fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD). La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de glucosa presente en la muestra ensayada. La glucosa es la mayor fuente de energía para las células del organismo; la insulina facilita la entrada de glucosa en las células. La diabetes mellitus es una enfermedad que cursa con una hiperglucémia, causada por un déficit de insulina 1,5,6 . El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio. 3.MATERIALES Espectrofotómetro Cubetas de 1,0 cm de paso de luz Micropipetas de 10 µL y de 1000 µL Papel de filtro R1: tampón (TRIS pH 7,4 Fenol) R2: enzimas (Glucosa oxidasa (GOD)  ,...