Práctica 4. Turbidimetría

1. OBJETIVO

Medir la concentración de una muestra de orina y su turbidez.

2. FUNDAMENTO

La turbidimetría es una técnica analítica de medición que determina cuánto se atenúa un haz de luz que se traslada a través de una suspensión. Esta atenuación se produce gracias a los fenómenos de absorción y dispersión que experimenta la luz debido a las partículas.

Entonces, se pueden deducir las dimensiones de las partículas presentes en una suspensión mediante la medición de la turbidez que hay en esta. En este sentido, este procedimiento se usa para cuantificar la absorción y dispersión de la luz: se demuestra su dependencia de las dimensiones de las partículas y de la concentración de estas en la suspensión.

3.MATERIALES

• 9 tubos de ensayo de 10 ml 

• 4 tubos de ensayo de 13 ml

• Muestra de orina en tubo cónico de 13 ml

• 7 cubetas de espectrofotometría

• Portacubetas

• Puntas de micropipeta de distintos tamaños

• Suero salino 0'9%

• Micropipetas de distintos volúmenes

• Agua destilada

• Patrón de proteína

• Albúmina bovina

• Ácido sulfosalicílico

• Vaso de precipitado

• Pipeta de 10 ml

• Auxiliar de pipeteo

• Pipeta Pasteur

• 2 gradillas

4.PROCEDIMIENTO

Comenzaremos centrifugando 5 minutos a 2500rpm la muestra de orina para obtener el sobrenadante y eliminar el sedimento. Dicho sobrenadante lo obtendremos usando una pipeta pasteur.

                

Después de esto necesitamos preparar 4 reactivos: D1, D2, D3 Y D4, que deberán contener lo siguiente:

A continuación prepararemos otros 7 tubos que  deberán contener:

Una vez preparados los tubos, transferimos dichos volúmenes a las cubetas y procedemos a su medición en el espectrofotómetro.

                                             

 Obtenemos los siguientes resultados:

5.ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS

Representación gráfica de los tubos P1, P2, P3 Y P4
Para poder representar la gráfica debemos averiguar las concentraciones de cada tubo:

Para averiguar la concentración de la muestra comparamos la absorbancia y la concentración de uno de los tubos que conocemos con la absorbancia de la muestra.

Por lo que: 

Una vez calculado dicha concentración , es la hora de representar todos los datos en una gráfica:

¿Por qué vemos turbidez?¿Qué hace el equipo con ella?
La turbidez es la propiedad óptica de una muestra que hace que la radiación sea dispersada y absorbida más que transmitida en línea recta a través de la muestra. Es ocasionada por la presencia de materia suspendida en un líquido.
El turbidímetro mide la intensidad de la luz dispersada a 90 grados cuando un rayo de luz pasa a través de las moléculas grandes que se encuentran suspendidas en una disolución , en este esta en la orina.