Práctica 13. Práctica de semen
1. OBJETIVO
Esta prueba tiene un doble objetivo: el análisis cuantitativo que permite conocer cuál es el volumen espermático o cantidad de esperma, además de la concentración y el número de espermatozoides, y el análisis cualitativo que permite saber cómo es su viscosidad, color y otras características.2. FUNDAMENTO
El análisis básico del semen evalúa de forma descriptiva los parámetros de eyaculados obtenidos mediante masturbación después de 3 a 4 días de abstinencia sexual. Las cualidades que se evalúan son el aspecto visual, olor, licuefacción, viscosidad, volumen, pH, concentración espermática y número total de espermatozoides, así como la movilidad y vitalidad espermática. Además, también la estimación de la aglutinación/agregación, y la evaluación de la presencia de detritus y otros tipos celulares en semen. La determinación de anticuerpos antiespermáticos se incluye también en el análisis básico de semen.El análisis de un eyaculado, obtenido mediante masturbación, empieza en el laboratorio 30 min después después de la eyaculación, y en todo caso no más tarde de una hora. Antes de producir una muestra de semen, el paciente ha de recibir información verbal y escrita acerca del propósito de la investigación y otros hechos importantes.
3.MATERIALES
- Dos muestras de semen
- Papel de filtro
- Pipeta Pasteur
- Portaobjetos
- Microscopio
- Baño termostático
- Gradlla
- Solución de nigrosina y eosina.
4.PROCEDIMIENTO
1. Identificar el recipiente con el espécimen seminal.
2. Colocar la muestra en un baño termostático para mantener la temperatura .
3. Realizamos un examen microscópico y un examen macroscópico:
EXAMEN MACROSCÓPICO:
-Licuefacción: presencia de grumos, coágulos o hebras.
-Aspecto: se valora en función de su color, opacidad o transparencia y la presencia de elementos gelatinosos. Normalmente es un líquido homogéneo, opalescente y de color blanquecino-amarillento.
-Viscosidad: hace referencia a la fluidez de la muestra. Nos indica la acidez o alcalinidad de una muestra seminal, siendo su valor normal igual o superior a 7'2.
-Volumen: el volumen normal de semen es superior a 1'5 mL e inferior a 6 mL. El volumen es el resultado de las secreciones de la próstata, vesículas seminales, epídidimo y testículo.
EXAMEN MACROSCÓPICO:
-Concentración:cantidad de espermatozoides por mililitro de semen. Se considera normal cuando la concentración de espermatozoides por mililitro es superior a 15 millones y la concentración en todo el eyaculado es superior a 39 millones.
-Movilidad: estudio del desplazamiento de los espermatozoides, encontrándose distintos patrones de movilidad:
- PR: espermatozoides con desplazamiento progresivo.
- NP: espermatozoides con movilidad no progresiva (movimiento “in situ”, sin desplazamiento).
- IMV: espermatozoides que no presentan movilidad.
-Vitalidad: refleja el porcentaje de espermatozoides que están vivos. Este parámetro no siempre ha de coincidir con el porcentaje de espermatozoides inmóviles. El valor de normalidad es cuando el porcentaje de espermatozoides vivos es superior al 58%. Cuando es inferior a este valor se denomina necrozoospermia.
-Morfología: este parámetro hace referencia a la forma del espermatozoide. El espermatozoide se compone de tres partes: cabeza, cuello o segmento intermedio y cola.
-Otros componentes celulares y detritos: en el semen nos vamos a encontrar normalmente otras células distintas a los espermatozoides, como pueden ser células epiteliales, células espermatogénicas y leucocitos.
La presencia de algunos tipos celulares en exceso nos puede indicar algunas alteraciones o patologías.
La presencia de aglutinaciones puede sugerir una infertilidad de origen inmunitario.
En la siguiente imagen podemos observar los datos de un seminograma:
Una vez realizado lo anterior para las dos muestras, realizamos lo siguiente:
1. Una vez eyaculado el semen, mezclamos las gotas de esperma con dos gotas de solución Eosina en un tubo de hemólisis.
2. Ahora, agregamos 2 gotas de solución Nigrosina y agitamos suavemente.
3. Disponemos una gota de la mezcla anterior antre porta y cubre y examinamos al microscopio.
1. Una vez eyaculado el semen, mezclamos las gotas de esperma con dos gotas de solución Eosina en un tubo de hemólisis.
2. Ahora, agregamos 2 gotas de solución Nigrosina y agitamos suavemente.
3. Disponemos una gota de la mezcla anterior antre porta y cubre y examinamos al microscopio.
5.ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS
En clase sólo realizamos lo siguiente:
MUESTRA 1:
Color: normal
Volumen: 5'5 mL
pH: 8
Licuado
Filancia: 0
Vitalidad: 80%
Vitalidad: 80%
Progresivos:70%
Aquí podemos observar su movilidad:
Color: normal
Volumen: 1 mL
pH: 7'5
Filancia: 5 cm
Vitalidad: 50%
Progresivos:30%
Vitalidad: 50%
Progresivos:30%
Aquí podemos observar su movilidad:
En cuanto a la primera muestra obtuvimos espermatozoides con desplazamiento progresivo. En cambio en la segunda obtuvimos espermatozoides con desplazamiento progresivo pero estos estaban en peores condiciones y no lograron cruzar el campo completo.
En cuanto a la primera muestra obtuvimos espermatozoides con desplazamiento progresivo. En cambio en la segunda obtuvimos espermatozoides con desplazamiento progresivo pero estos estaban en peores condiciones y no lograron cruzar el campo completo.
6.OBSERVACIONES
El tiempo de procesado de muestra es muy importante ya que si pasa más de media hora los espermatozoides habrán disminuido notablemente, además el examen macroscópico no podrá realizarse correctamente.
La práctica fue realizada con éxito porque pudimos realizar todas las pruebas que disponíamos en clase.
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